Le test Widal, développé en 1896 par Georges-Fernand Widal, est une méthode d’agglutination indirecte utilisée pour diagnostiquer la fièvre entérique. Il consiste à mélanger des bactéries responsables de la fièvre typhoïde avec un sérum contenant des anticorps spécifiques d’un individu infecté. Les résultats doivent être interprétés avec prudence en considérant les antécédents de fièvre entérique, la vaccination contre la typhoïde et le niveau global d’anticorps dans les populations mondiales. La fièvre entérique, causée par Salmonella Typhi et Paratyphi, est une infection systémique répandue à l’échelle mondiale, avec une prévalence marquée en Afrique, en Amérique du Sud et dans le sous-continent indien.
Le test de Widal et Felix est un test sérologique utilisé pour détecter les anticorps dirigés contre les bactéries Salmonella typhi et Salmonella paratyphi dans le sérum des patients. La procédure implique le prélèvement d’un échantillon de sang, la séparation du sérum, la préparation des antigènes, la réaction antigène-anticorps, et l’observation des résultats. Les agglutinations observées indiquent la présence d’anticorps spécifiques, et les titres d’anticorps sont interprétés pour évaluer une infection récente ou en cours.
Introduction
Développé en 1896 par Georges-Fernand Widal et portant son nom, le test Widal est une méthode d’agglutination indirecte utilisée pour diagnostiquer la fièvre entérique ou fièvre typhoïde et paratyphoïde. Il implique le mélange de bactéries responsables de la fièvre typhoïde avec un sérum contenant des anticorps spécifiques provenant d’un individu infecté. En cas d’infection à Salmonella, le test peut générer un résultat faussement positif à l’O-soma. Une interprétation attentive des résultats est essentielle, tenant compte des antécédents de fièvre entérique, de la vaccination contre la typhoïde et du niveau global d’anticorps dans les populations des zones d’endémie à travers le monde (Bakr et al., 2010).
La fièvre entérique, causée par Salmonella enterica sérovar Typhi (S. Typhi) et Salmonella enterica sérotype Paratyphi A, B et C (S. Paratyphi A, B et C), également connue sous le nom de salmonelle non typhoïdique (SNT), est une infection systémique aiguë chez l’homme. Cette maladie, prévalente à l’échelle mondiale, est particulièrement répandue en Afrique, en Amérique du Sud et présente un risque élevé dans le sous-continent indien (Ibegbulam et al., 2014).
Description du test de Widal
Le test de Widal et Felix est un test sérologique utilisé pour détecter la présence d’anticorps spécifiques dirigés contre les bactéries Salmonella typhi et Salmonella paratyphi dans le sérum d’un individu (Ibegbulam et al., 2014). Les étapes sont les suivantes,
Prélèvement de l’échantillon : Un échantillon de sang du patient est prélevé.
Séparation du sérum : Le sang est centrifugé pour séparer le sérum, la partie liquide du sang, qui contient les anticorps.
Préparation des antigènes : Des antigènes spécifiques de Salmonella typhi et Salmonella paratyphi sont préparés. Ces antigènes sont des protéines provenant des bactéries.
Réaction antigène-anticorps : Le sérum du patient est mélangé avec les antigènes de Salmonella typhi et Salmonella paratyphi. Si des anticorps dirigés contre ces bactéries sont présentes dans le sérum, une réaction immunologique se produit.
Observation des résultats : Les résultats du test sont observés à la recherche d’agglutinations. Si des agglutinations se forment, cela indique la présence d’anticorps spécifiques dans le sérum du patient.
Interprétation des résultats : Les résultats sont interprétés en fonction du titre d’anticorps observé. Un titre élevé peut indiquer une infection récente ou en cours par Salmonella typhi ou Salmonella paratyphi.
Définition du sérodiagnostic de Widal et Félix
Les fièvres typhoïde et paratyphoïde résultent de l’infection par une variante spécifique de la bactérie Salmonella, appartenant à la sous-espèce Salmonella enterica (Figure 1). Ces infections sont associées aux sérotypes Typhi, Paratyphi A, ainsi qu’à certaines souches des sérotypes Paratyphi B et Paratyphi C.
Figure 1 : Salmonella
Widal test est un test d’agglutination qui détecte la présence d’agglutinines sériques (H et O) dans le sérum des patients atteints de fièvre typhoïde et paratyphoïde.
Le sérum du patient est testé pour H anticorps (agglutinines) contre les suspensions antigéniques suivantes (suspensions habituellement colorées) O et: S., Typhi 0., Typhi antigène H
Le principe de base de l’essai de Widal est que si l’anticorps homologue est présent dans le sérum des patients, il réagit avec l’antigène respectif dans le réactif et donne montage visible sur la carte de test et l’agglutination dans le tube.
Les antigènes utilisés dans le test sont «H» et des antigènes « O » de Salmonella Typhi et de l’antigène «H» de S. Paratyphi.
Le paratyphoïde antigène «O» ne sont pas employés comme ils traverser réagissent avec la typhoïde « O » antigène en raison du partage du facteur 12. « O » antigène est un antigène somatique et l’antigène « H » est l’antigène flagellaire (Figure 2).
Principe
Le système immunitaire du patient réagit à une infection bactérienne à Salmonella en générant des anticorps contre la bactérie. Ces anticorps visent à neutraliser l’infection et deviennent généralement détectables dans le sang environ 6 jours après le début de l’infection.
- Anticorps contre l’antigène flagellaire de Salmonella typhi (H).
- Anticorps contre l’antigène flagellaire de S.paratyphi A (AH).
- Anticorps contre l’antigène flagellaire de S.paratyphi B (BH).
- Anticorps contre l’antigène somatique de S.typhi (O).
Le test Widal fonctionne en détectant dans le sérum du patient ces anticorps spécifiques contre Salmonella à l’aide d’antigènes de Salmonella préparés (réactifs disponibles dans le commerce).
- Un résultat positif est indiqué par la présence d’une agglutination.
- L’absence d’agglutination indique un résultat négatif.
Note:
- Un résultat négatif n’exclut pas un diagnostic de salmonellose
- Les antigènes paratyphoïdes O ne sont pas utilisés car ils réagissent de manière croisée avec l’antigène typhoïde O.
Réactifs
Le kit de test contient les réactifs suivants
- Réactif 1 : S.typhi (H), contient l’antigène H de Salmonella typh.
- Réactif 2 : S.typhi (O), contient l’antigène O de Salmonella typh.
- Réactif 3 : S.paratyphi A (AH), contient l’antigène H de Salmonella paratyphi A.
- Réactif 4 : S.paratyphi B (BH), contient l’antigène H de Salmonella paratyphi B.
- Contrôle négatif (NC) : ce contrôle ne contient pas d’anticorps contre Salmonella typhi et sert de référence pour valider les résultats des tests. Cela ne devrait pas produire de réaction positive.
- Contrôle positif (PC) : il est utilisé pour garantir que le test fonctionne correctement et doit produire une réaction positive.
Objectif : Examen sérologique de la fièvre entérique ; Test de : Fièvre typhoïde (fièvre entérique) ; Fondé sur : Séropositivité – réaction d’immunagglutination en présence d’un agent infectieux spécifique.
Figure 2 : Matériel et principe du test de Widal
Echantillon : Le sérum obtenu après centrifugation du sang prélevé dans un tube sec est l’unique échantillon valide pour ce test. Tout sérum lipémie et sérum provenant d’un sang hémolysé au prélèvement ne doivent pas être utilisés.
Procédure opératoire :
1) À l’aide d’une micropipette, déposer 20 µL de sérum dans chacun des 8 cercles d’une plaque de rotation.
2) Homogénéiser soigneusement les différents flacons de réactifs pour suspendre les antigènes colorés, puis déposer une goutte dans chacun des 8 cercles correspondants.
3) Mélanger les deux gouttes (sérum et réactif) dans chaque cercle de manière à couvrir entièrement la surface, sans déborder.
4) Assurer une homogénéisation minutieuse sur une plaque rotative pendant exactement 1 minute.
5) Examiner attentivement les différents cercles à la recherche d’agglutinations.
6) Le cercle présentant une agglutination indique un titre d’anticorps de 1/30.
7) Poursuivre le processus en plaçant respectivement le sérum sur les cercles d’une nouvelle plaque et y introduire le réactif des cercles présentant des agglutinations à l’étape 6.
8) Répéter les étapes 3, 4 et 5.
9) Les cercles correspondant à 10 µL présentant des agglutinations possèdent un titre d’anticorps de 1/160, tandis que ceux correspondant à 5 µL possèdent un titre d’anticorps de 1/360.
Remarque : L’agglutination des antigènes (Réactifs) indique la présence d’anticorps dans le sérum du patient. Des titres de 1/80 peuvent être significatifs, signalant ainsi une infection à S. typhi ou Paratyphi, à corréler avec les manifestations cliniques du patient.
Conclusion
Le test Widal, malgré sa longue histoire, demeure un outil important pour le diagnostic de la fièvre entérique. Cependant, son interprétation nécessite une compréhension approfondie des facteurs influençant les résultats. La fièvre entérique reste un défi mondial de santé publique, surtout dans les régions à hygiène précaire. Le sérodiagnostic de Widal et Felix continue de jouer un rôle crucial dans la détection et la gestion de ces infections, tout en soulignant l’importance d’une approche holistique tenant compte des antécédents médicaux et épidémiologiques des patients.
Références
- Ibegbulam Njoku, Peace N; Chijioke Osuji, C C; Duru, F C (2014). Prevalence of antibody titre in healthy individual and enteric fever patients in Owerri, Nigeria. Journal of Public Health and Epidemiology, 8(6), 192-196. doi:10.5897/jphe2013.0612.
- Bakr WM, El Attar LA, Ashour MS, El Tokhy AM (2010). « Test TUBEX versus test Widal dans le diagnostic de la fièvre typhoïde à Kafr El -Shekh, Egypte ». J Assoc. égyptienne de santé publique. 85 (5-6) : 285-96.
- http://www.emro.who.int/emhj/1001_2/emhj_2004_10_1_2_180_186.pdf?ua=1
Auteurs/autrices
Voir Aussi:
Laisser un commentaire